四(sì)川羊(yáng)肚菌菌种生产基地浅(qiǎn)谈羊肚菌菌种的培育方法
发布日期:2019-05-06
本技术公开了一种中药(yào)材的优质(zhì)高(gāo)产种植方(fāng)法。该方法包括以下步骤:(1)母种的(de)制作及培养(yǎng),包括①制作母种培养(yǎng)基:将(jiāng)250g土(tǔ)豆、30g琼(qióng)脂、25g葡萄糖和(hé)3g维生素B放入(rù)2000ml的水(shuǐ)中加热,直至琼脂(zhī)完全煮化即得母种培养基,②培育母(mǔ)种:将试管放入(rù)密封的(de)无菌接种箱中(zhōng),每个试管中接入1cm×1cm的菌丝后(hòu),置(zhì)于20℃培养箱中,直至生长(zhǎng)成母种;(2)原种的制作及(jí)培养,包括①制作原种(zhǒng)培养(yǎng)基:取小麦80%、木销(xiāo)10%和麦(mài)麸10%,将所述小麦煮熟后(hòu)捞(lāo)出,与所述木销和麦(mài)麸搅拌均匀,水分控制在60-80%,100℃下保温6小时,②培育原种;(3)栽培中的(de)制作及(jí)培养,包括①制作栽培种培养基和②培育栽(zāi)培种(zhǒng)。本技术中,培育出优良的羊(yáng)肚菌菌种,提高了种植的存活率(lǜ)。
具体实施方(fāng)式(shì)
一种(zhǒng)羊肚菌菌种的培育方法,该方(fāng)法包括(kuò)以下步骤:
(1)母(mǔ)种的制作(zuò)及培养
①制作母种培养基:将250g土豆,30g琼脂,25g葡萄(táo)糖(táng)和(hé)3g维(wéi)生素B放入2000m1
的水中加热,直至琼脂完全(quán)煮化即得母种培养(yǎng)基;
②培育(yù)母种:取所述母种培养基 200ml装入300ml的试管(guǎn)中,用(yòng)棉花塞住管口,将所述试管放在125℃的高压灭菌(jun1)锅内(nèi)灭菌1. 5h冷却至室温后,将(jiāng)所(suǒ)述试管放入密封的无菌接种箱中(zhōng),每个试(shì)管中(zhōng)接入(rù)1cmX 1cm的菌丝后(hòu),置于20℃培(péi)养箱中,直至生长(zhǎng)成(chéng)母(mǔ)种。
在(zài)步骤(1)中,土(tǔ)豆需(xū)要(yào)预先放入水中煮半小时(shí),之后将(jiāng)其捞(lāo)山,再与(yǔ)琼脂、葡(pú)萄糖、维生(shēng)素B一起放入水中煮,直至琼脂煮化,将煮好的培养(yǎng)基放在试管里(lǐ),等(děng)凝固之(zhī)后,再用棉花寒住(zhù)试(shì)管(guǎn)的(de)管口。进行母种(zhǒng)的培育时(shí),在将试管放入接种(zhǒng)箱之前,还需要用75%的酒精(jīng)擦拭试管(guǎn),对试管的外壁进(jìn)行洒精消毒。
在将试管放进无菌接种(zhǒng)箱内时,还需要将用(yòng)于接种的下其一同(tóng)放进接种(zhǒng)箱的,如:托盘、酒精灯、打火(huǒ)机、器(qì)皿、接(jiē)种钩(gōu)、镊子等一起放入接种箱内进(jìn)行消(xiāo)毒(dú)处理.对于接种(zhǒng)箱内的消毒处(chù)理,可(kě)以将装有高锰酸钾(jiǎ)和甲醛混合物的被子放入接种箱内,消毒时保(bǎo)证接种箱的密封。
(2)原种(zhǒng)的制作及培(péi)养(yǎng)
①制作原种培养基:以质量分数计,取小麦80
%、木销10%和麦麸(fū)10%,将所述小麦煮熟后捞出,与所述木销和(hé)麦数搅拌均匀(yún),水分控制在(zài)60-80 %
,装入培养瓶中,瓶(píng)口用棉花塞住(zhù),将所述培(péi)养瓶放在火菌锅里火菌后(hòu),100℃下保(bǎo)温(wēn)6小时,取出冷却后即得原种培(péi)养(yǎng)基;
②培育原种:将所述培养瓶和装有(yǒu)母种的试(shì)管放入(rù)接(jiē)种(zhǒng)箱中密(mì)封半小时后,再(zài)将试管中(zhōng)的毋种接入到所述原(yuán)种培养基的培养瓶(píng)中,保持温度20℃即(jí)可(kě)。
(3)较培中的制作及培养
①制作栽培种培养基:以质量(liàng)分数计,取小麦75%煮熟后捞出,放入15%木销、
5%麦麸和(hé)5%泥上(shàng)搅拌均匀(yún),含水量60% -80%.装入聚丙烯袋(dài)中封口,将所述聚丙烯袋放在灭菌锅里灭菌.常压100℃下保存4小时,取出冷却至室温(wēn):
②培育栽培种:将(jiāng)所述聚丙烯袋(dài)和原种培养(yǎng)基的(de)培养瓶置于(yú)接种(zhǒng)箱中密封(fēng)半小时后,再将步骤(2)培养(yǎng)的原种(zhǒng)接入到所述聚丙烯袋(dài)巾,在20℃环境(jìng)下培养15-20天可获得栽培种。
在上(shàng)述(shù)的步(bù)骤(1)之前(qián),还需(xū)要采(cǎi)集新鲜(xiān)的(de)羊肚菌子(zǐ)实体(tǐ),将子实体切(qiē)成直(zhí)径
2-3mm的菌块,取(qǔ)经(jīng)过高压灭菌的PDA培养纂,将所(suǒ)述菌块放在PDA培养基上(shàng),将所(suǒ)述PDA培养基置于20℃的培养箱中,,周后可获得菌(jun1)丝。
在本方案中(zhōng),接(jiē)种箱始终(zhōng)处于无菌(jun1)状态,在(zài)进行培养基的接种处理时,在(zài)接种箱(xiāng)内放入一杯(bēi)装有高锰(měng)酸(suān)钾(jiǎ)和甲醉的混合液体,用于对接种(zhǒng)箱内的空气进行杀菌消毒(dú)处理。
与现有技术相比.本技术实(shí)施例具有以下优点(diǎn):
通过应用(yòng)本(běn)技术实施例的技术方案,在(zài)羊肚菌菌(jun1)种的培育过(guò)程中,通过对(duì)现(xiàn)有技术中的培养基配方进行改(gǎi)进,在菌种培育的各阶段(duàn)采用不同的培养基达到最好的培育效果,木方案提供的菌种培(péi)育方法,培育出的羊肚(dù)菌菌(jun1)种品质优良,同时,大大(dà)提高了羊(yáng)肚菌种植的存活率(lǜ)。